限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切条件的优化

目的：探讨KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。方法 KpnⅠ和EcoRⅠ不同的酶切体系,酶切含有上述两种限制性内切酶酶切位点的载体pEGFP-Ano2,DNA琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果,以获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。结果50μL酶切体系,KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的适宜条件：首先在1×L缓冲液情况下,应用1μL KpnⅠ酶切1μg质粒1 h,再加入1×H缓冲液和0．01％BSA,应用1μL EcoRⅠ继续酶切1 h。结论获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切质粒的适宜条件,为今后应用KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切实验提供科学的参考依据。     

CRISP2基因及蛋白在弱精子症患者中的表达及其临床意义

目的 弱精子症作为男性不育的重要因素之一,影响着全球15％的育龄夫妇,但其发病机制尚待阐明.课题组前期研究通过基因芯片技术发现CRISP2在弱精子症患者精子中表达明显下调,但其临床意义仍有待进一步阐明.方法 收集2013年1月至2013年6月的弱精子症患者及健康男性精液标本各24例,检测这些精液样本中CRISP2基因及蛋白表达水平,探讨其与精子形态、运动能力及生育预后的相关性.结果 弱精子症患者精液标本中CRISP2蛋白表达水平明显低于正常对照组,而CRISP2基因mRNA表达水平并无明显统计学差异.相关性分析显示CRISP2蛋白表达水平与形态正常精子率(r=0.6182,P=0.0037)及前向运动能力(r=0.6309,P=0.0029)呈明显正相关.经过密切随访,CRISP2蛋白高表达患者配偶受孕率明显高于CRISP2蛋白低表达患者(80.0％vs20.0％,P=0.0230).结论 CRISP2蛋白表达水平与弱精子症患者的精子形态、前向运动能力呈正相关,且CRISP2蛋白低表达的弱精子症患者生育预后不良,提示CRISP2作为弱精子症患者治疗新靶点的潜在价值.     

黄芪穴位注射配合药物吸入治疗支气管哮喘急性期临床观察

目的:观察用黄芪注射液穴位注射配合药物吸入治疗支气管哮喘(急性期)的临床疗效。方法:60例支气管哮喘患者随机分为两组,治疗组30例采用黄芪注射液穴位注射并配合药物吸入,1次/d,10 d;对照组30例采用单纯药物吸入,1次/d,10 d。观察治疗前后症状、体征评分的变化来评定疗效。结果:(1)黄芪注射液穴位注射配合药物吸入法能改善支气管哮喘急性期临床症状、体征,与单纯药物吸入法比较,差异具有统计学意义(P0.05),说明黄芪注射液穴位注射配合药物吸入法治疗支气管哮喘急性期优于单纯药物吸入法。(2)治疗后,总有效率治疗组83.33%、对照组73.33%,两组疗效比较差异具有统计学意义(P0.05),说明黄芪注射液穴位注射配合药物吸入法治疗支气管哮喘急性期临床疗效优于单纯药物吸入法。结论:黄芪注射液穴位注射配合药物吸入法治疗支气管哮喘(急性期)能改善患者主要症状及体征,疗效确切。     

子宫颈涂片法细胞病理学检查的应用分析

目的：探讨子宫颈细胞学刮片检查在宫颈癌及癌前病变筛查中的应用价值。方法总结13751例子宫颈刮片细胞检测和TBS分类结果,将阳性结果与子宫颈活检的病理诊断结果进行比较。结果13751例受检人员中不典型鳞状细胞及以上病例515例,阳性检出率为3.78%。其中,349例行子宫颈活检,CIN以上病变217例,占活检病例的62.18%。刮片检测与阴道镜下病理活检结果的符合率为79.50%。结论子宫颈刮片是一种简单、方便、有效的宫颈癌普查方法,便于基层医院和偏远地区使用。     

156 例呼吸机相关性肺炎临床治疗分析

目的研究探讨呼吸机相关性肺炎临床治疗的疗效及安全性。方法回顾性分析该院2010年1月1日-2012年12月31日期间收治的156例呼吸机相关l生肺炎患者的临床资料．观察机械通气48h以上患者．通过患者体温、气管内吸出脓性分泌物、外周廊白细胞、痰细菌培养、X线胸片,诊断呼吸机相关性肺炎,将患者随机分为两组,分别采用头孢他啶和头孢哌酮,舒巴坦进行治疗,对比两组患者疗效的结果以及细菌清除率情况。分析其致病茵,进行汇总。结果观察组患者的治疗效果以及细菌清除率情况均显著好于对照组（P〈O．05）。机械通气48h以上患者中78．2％有呼吸机相关性肺炎。单纯致病菌35例．≥2种致病菌35例。病原菌培养结果：金黄色葡萄球菌27例、铜绿假单胞菌29例、白色念珠菌17例、克雷伯杆菌13例。结论头孢哌酮／舒巴坦治疗肺炎的疗效较好,绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等是呼吸机相关性肺炎的主要致病菌,该研究就呼吸机相关性肺炎的流行病学及诊断作出综述并进行积极防治,缩短患者机械通气时间、提高生存率。     

腹腔镜与开放膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术的临床效果比较

目的比较腹腔镜与开放膀胱根治性切除-原位回肠新膀胱术治疗侵润性膀胱癌患者的临床效果。方法回顾性分析该院自2009年1月—2012年6月收治的36例侵润性膀胱癌患者的临床资料,按照不同术式分为腹腔镜组（n=16）和开放手术组（n=20）。比较两组患者围手术期情况、术后并发症和术后1年的膀胱功能。结果观察组手术时间明显长于对照组[（366.8±42.5）min vs（308.4±38.2）min],而术中出血量[（482.3±23.5）mL vs（1078.3±344.6）mL]和术后住院时间[（22.8±3.7）d vs（28.6±4.9）d]均明显小于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。观察组术后并发症明显少于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;而两组患者术后1年的膀胱容量、膀胱内压和残余尿差异无统计学意义（P〉0.05）。结论腹腔镜下膀胱根治性切除术-原位回肠新膀胱术对机体损伤小、术后恢复快和并发症较少的优点,且术后膀胱功能与开放手术相当,是一种值得推广应用的术式。     

戊四氮致痫幼鼠不同脑区脑损伤研究

目的：研究S100B蛋白、碱性髓鞘蛋白（MBP）和神经元特异性烯醇酶（NSE）在戊四氮（PTZ）诱导致痫幼鼠海马、额叶、中脑和血清中的动态改变,评鉴癫痫（EP）造成不同脑区的神经损伤。方法雄性SD幼鼠60只,随机分对照组（10只）和实验组（50只）。实验组腹腔注射（IP）PTZ 50 mg/kg 1次,A组IP生理盐水。根据EP发作分级,0～1级9只视为B组,立即取脑;2级以上发作41只,于EP发作后0 h（C＝10）、6 h（D＝11）、24 h （E＝10）、72 h（F＝10）断头,分别取下海马、中脑和额叶皮质,断头前抽取躯干血。采用ELISA法检测血清和各脑区S100B和MBP ,采用EIA法检测血清和各脑区 NSE值。结果 EP发作后,海马、额叶和血清S100B蛋白、MBP和NSE均明显高于对照组。海马和额叶的NSE峰值出现在中脑NSE之前。各脑区和血清S100B蛋白皆于EP后24 h达高峰,而MBP于EP后72 h达高峰。结论 EP发作可以造成大脑不同脑区神经元细胞、胶质细胞和神经髓鞘的损伤。     

广州市2000-2010年男男性行为人群艾滋病流行状况分析

目的掌握广州市男男性行为人群(MSM)艾滋病流行特征和趋势,为制定与落实防控策略和措施提供科学依据。方法对广州市2000-2010年艾滋病病例报告、血清学横断面调查、新发感染率队列研究和疫情估计等数据进行综合整理分析。结果广州市2000年报告首例MSM病例,至2010年共报告526例,其中2008-2010年报告数占92.2%。2010年血清学监测MSM人群的HIV感染率为7.4%,较2006年的1.3%显著增加。2009-2010年MSM队列研究HIV发病密度为3.2/100人年。2009年疫情估计广州市MSM规模约34 810~61 616人,存活的MSM感染者约有1 666人。结论广州市2000-2010年MSM人群艾滋病感染人数呈逐年增加的趋势,但发现比例较小,亟需加强该人群的动员检测工作力度,提高病例发现率,并加强病例管理,阻断二代传播。